、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后,000*g離心0分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心的分離。
2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液:000×g離心0分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。000×g離心0分鐘,取上清液。
5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二、注意事項(xiàng):
、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2、豬ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。
7、加入試劑的順序,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
8、按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。