ELISA結(jié)果出現(xiàn)干擾時(shí)，可以通過(guò)處理內(nèi)源性干擾物質(zhì)、處理外源性干擾物質(zhì)、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件等方法來(lái)解決。

處理內(nèi)源性干擾物質(zhì)

類風(fēng)濕因子：可以使用F(ab)2替代完整的IgG，或者用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理標(biāo)本。

補(bǔ)體：使用EDTA稀釋標(biāo)本，或者加熱滅活C1q。

嗜異性抗體：可以通過(guò)理化方法解離復(fù)合物。

嗜靶抗原自身抗體：測(cè)定前需用理化方法將其解離后再測(cè)定。

醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體：避免使用含有此類抗體的標(biāo)本，或者使用針對(duì)人源性抗體的二抗。

交叉反應(yīng)物質(zhì)：選擇特異性強(qiáng)的抗體，或者使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。

處理外源性干擾物質(zhì)

標(biāo)本溶血：避免標(biāo)本溶血，或者使用去蛋白劑去除血紅蛋白。

標(biāo)本受細(xì)菌污染：對(duì)標(biāo)本進(jìn)行滅菌處理。

標(biāo)本保存不當(dāng)：新鮮采集標(biāo)本，避免長(zhǎng)時(shí)間保存，或者使用凍存后的標(biāo)本時(shí)要充分混合。

標(biāo)本凝集不全：讓血液充分凝固后再分離血清。

標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響：避免使用含有干擾物質(zhì)的采血管，或者調(diào)整實(shí)驗(yàn)條件以消除干擾。

優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件

選擇合適的酶和底物，避免非特異性顯色。

優(yōu)化洗滌步驟，去除未結(jié)合的抗體和抗原。

控制實(shí)驗(yàn)溫度和時(shí)間，確保反應(yīng)條件一致。

以上方法可以幫助解決ELISA結(jié)果中的干擾問(wèn)題。在實(shí)際操作中，可能需要根據(jù)具體情況綜合運(yùn)用多種方法，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性。