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簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品可保兔晶狀體上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔晶狀體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔晶狀體上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號(hào)：GOY-01X0695廠商性質(zhì)：科研更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：366產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：兔晶狀體上皮細(xì)胞
貨號(hào)：GOY-01X0695
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類：原代細(xì)胞
2.組織來源：晶狀體組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：兔晶狀體上皮細(xì)胞分離自晶狀體組織；晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層，僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物，晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細(xì)胞分開；因而，晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾，又不受其它類型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染，保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡，包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中，晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟，然后遷移到晶狀體內(nèi)部，產(chǎn)生晶體蛋白，自身也拉長(zhǎng)而變成晶狀體纖維細(xì)胞，并終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。研究表明，晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長(zhǎng)因子的調(diào)控，包括表皮生長(zhǎng)因子和胰島素等。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形，呈單層生長(zhǎng)、連成膜狀。晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞，其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān)，體外培養(yǎng)是研究其生長(zhǎng)規(guī)律的主要手段。
5.方法簡(jiǎn)介：公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔晶狀體上皮細(xì)胞經(jīng)BFSP2（晶狀體蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 傳代特性 可傳2-3代 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
兔晶狀體上皮細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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