簡要描述:產(chǎn)品可保小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞
貨號:GOY-01X0774
分類:原代細胞
2.組織來源:甲狀腺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞分離自甲狀腺組織;甲狀腺是脊椎動物非常重要的腺體,屬于內(nèi)分泌器官。在哺乳動物身體中,它位于頸部甲狀軟骨下方,氣管兩旁。甲狀腺表面有結(jié)締組織被膜,表面結(jié)締組織深入到腺實質(zhì),將實質(zhì)分為許多不明顯的小葉,小葉內(nèi)有很多甲狀腺濾泡和濾泡旁細胞。甲狀腺控制使用能量的速度、制造蛋白質(zhì)、調(diào)節(jié)機體對其他賀爾蒙的敏感性。甲狀腺依靠制造甲狀腺素來調(diào)整這些反應(yīng),有T3和T4。這兩者調(diào)控代謝、生長速率還有調(diào)解其他的身體系統(tǒng)。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲狀腺也生產(chǎn)降鈣素,調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣的平衡。其中,甲狀腺濾泡上皮細胞(也稱為濾泡細胞或主要細胞)是在甲狀腺細胞是負責(zé)生產(chǎn)和分泌甲狀腺激素,甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原(T3)。
5.方法簡介:公司實驗室分離的小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:公司實驗室分離的小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞經(jīng)TG(甲狀腺球蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 上皮細胞樣 傳代特性 可傳1-2代 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
培養(yǎng)操作:
小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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