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簡要描述：產(chǎn)品可保兔子宮平滑肌細(xì)胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔子宮平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔子宮平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號：GOY-01X0824 廠商性質(zhì)：科研更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：302產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：兔子宮平滑肌細(xì)胞
貨號：GOY-01X0824
分類：原代細(xì)胞
2.組織來源：子宮組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：兔子宮平滑肌細(xì)胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚，由成束或成片的平滑肌組成，肌束間以結(jié)締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能，收縮受激素的調(diào)節(jié)，其收縮活動(dòng)有助于精子向輸卵管運(yùn)送、經(jīng)血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管，如果平滑肌層細(xì)胞過度生長，勢必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，體外培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機(jī)制。子宮平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。子宮平滑肌細(xì)胞的主要功能：①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài)，在孕期能大化的擴(kuò)張子宮容積，保證胎兒孕育環(huán)境；②平滑肌細(xì)胞有收縮舒張能力，在生產(chǎn)時(shí)能形成生理性的縮腹環(huán)，推動(dòng)胎兒向下移動(dòng)，輔助生產(chǎn)。
5.方法簡介：公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮平滑肌細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài) 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
兔子宮平滑肌細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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