簡要描述:產品可保大鼠腎上腺皮質細胞的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠腎上腺皮質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腎上腺皮質細胞的體外培養(yǎng)。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
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產品名稱:大鼠腎上腺皮質細胞
貨號:GOY-01X1365
分類:原代細胞
2.組織來源:腎上腺組織
3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:大鼠腎上腺皮質細胞分離自腎上腺組織;腎上腺是人體相當重要的內分泌器官,由于位于兩側腎臟的上方,故名腎上腺。腎上腺左右各一,位于腎的上方,共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形,右腎上腺為三角形。從側面觀察,腺體分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩部分,周圍部分是皮質,內部是髓質。腎上腺內部是髓質部分,分泌腎上腺素。這些激素在應激狀態(tài)釋放增多,能夠幫助升高血壓,加快心率,升高血糖,動員全身的儲備物質,為機體與外界環(huán)境的抗爭作好充分準備。腎上腺外部是皮質部分,分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收,正常數(shù)量的醛固酮,對維持人體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌,會導致高血壓和低血鉀。是人體必需的激素之一。當人體處于應激狀態(tài)時,比如感冒,發(fā)燒,遇到突發(fā)事件的時候,腎上腺皮質分泌大量的,這些能夠動員機體的存儲能源,為應對內部或者外部重要事件提供充分的物質準備。當缺乏時,機體在遇到重大事件的時候,往往缺乏足夠應對能力,容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產生的雄激素,對男性來講,并非,但是對女性而言,是雄激素的一個重要來源。
5.方法簡介:公司實驗室分離的大鼠腎上腺皮質細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:公司實驗室分離的大鼠腎上腺皮質細胞經3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳1-3代左右;2代以內狀態(tài) 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
培養(yǎng)操作:
大鼠腎上腺皮質細胞1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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