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簡要描述：產(chǎn)品可保小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號：GOY-01X1396 廠商性質(zhì)：科研更新時間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：368產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞
貨號：GOY-01X1396
分類：原代細胞
2.組織來源：腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在銀浸染標本中，少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞。少突膠質(zhì)細胞（oligodendrocyte）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細胞，其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細胞祖細胞、前少突膠質(zhì)細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細胞等階段。有學者將少突膠質(zhì)細胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是，細胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程，其形態(tài)、表達產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴格的界限，因此，其分類是相對的。這三型分別為：Ⅰ型少突膠質(zhì)細胞又稱前O2A（pre-O2A progenitor cell）。細胞呈圓形，表面光滑，直徑約3μm，體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質(zhì)表面，具有很強的分裂增殖潛力，表達GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子（polysialic acid-neural
cell adhesion molecule，PSA-NCAM）等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細胞胞體常有雙極或三極突起，極少數(shù)為單極突起，直徑約7μm，有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時為雙潛能細胞，既可分化為少突膠質(zhì)細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì)，故又稱為少突膠質(zhì)細胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細胞（oligodendrocyte-type-2 astrocyte
progenitor cell，O2A）。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3和GQ（淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體），故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細胞不再具有分裂增殖能力，為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力，又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細胞。不成熟的OL胞體常伸出4～5條較粗大突起，表面還殘留有A2B5標記物，同時也表達O1-O4抗原，無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細胞突起有如蜘蛛網(wǎng)，大量表達半乳糖腦苷脂（galactocerebro side，GC）、蛋白脂蛋白（proteio lipid protein，PLP）、髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）等，有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細胞前體細胞（簡稱少突膠質(zhì)細胞前體細胞）包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質(zhì)細胞，前兩者具有增殖能力。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細胞采用消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2天半量換液1次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 雙極、多極形 傳代特性 不傳代，不增值，存活1-2周 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
產(chǎn)品咨詢
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