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簡要描述：產(chǎn)品可保小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號(hào)：GOY-01X1404 廠商性質(zhì)：科研更新時(shí)間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：390產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞
貨號(hào)：GOY-01X1404
分類：原代細(xì)胞
2.組織來源：皮膚組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上，附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(gè)結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成，除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來。真皮毛乳頭細(xì)胞位于毛囊基底部，是一類成纖維細(xì)胞。在毛囊發(fā)育早期，真皮細(xì)胞向單層上皮細(xì)胞發(fā)出真皮信號(hào)，刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細(xì)胞向下方的真皮發(fā)出表皮信號(hào)，誘導(dǎo)其形成有成纖維細(xì)胞組成的凝集細(xì)胞團(tuán)。在此過程中，毛母質(zhì)細(xì)胞逐漸包裹凝集細(xì)胞團(tuán)，形成成熟的真皮毛乳頭細(xì)胞。作為毛囊中的重要細(xì)胞群，真皮毛乳頭細(xì)胞的分子機(jī)制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認(rèn)識(shí)和解析。
5.方法簡介：公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞采用膠原酶-混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞經(jīng)層粘連蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次； 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳1-2代 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
產(chǎn)品咨詢
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