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產品名稱：轉酮醇酶樣蛋白1(TKTL1)重組蛋白(Human，人)
物種：Homo sapiens
(Human，人)
英文名稱：Recombinant
Transketolase Like Protein 1 (TKTL1)
TKR; TKT2; TK 2; Transketolase-related protein; Transketolase 2
型號：GOY-01D1644
物種 | Homo sapiens (Human，人) |
來源 | 原核表達 |
宿主 | E.coli |
亞細胞定位 | n/a |
預測分子量 | 58.9kDa |
實際分子量 | |
片段與標簽 | Met1~Asp259 with N-terminal His and GST Tag |
緩沖液成份 | 磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM
DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） |
性狀 | 凍干粉 |
純度 | >90% |
內毒素水平 | <1.0EU/μg(LAL法測定) |
等電點 |
|
應用 | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1．轉酮醇酶樣蛋白1(TKTL1)重組蛋白(Human，人) 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融
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