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簡要描述：Ⅹ組磷脂酶A2(PLA2G10)重組蛋白(Mouse，小鼠)緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
產(chǎn)品型號：GOY-01D2913 廠商性質(zhì)：科研更新時間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：216產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：Ⅹ組磷脂酶A2(PLA2G10)重組蛋白(Mouse，小鼠)
物種：Mus musculus
(Mouse，小鼠)
英文名稱：Recombinant
Phospholipase A2, Group X (PLA2G10)
GXPLA2; GX sPLA2; sPLA2-X; Group 10 secretory
phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 10
型號：GOY-01D2913
物種 | Mus musculus (Mouse，小鼠) |
來源 | 原核表達 |
宿主 | E.coli |
亞細胞定位 | 分泌 |
預(yù)測分子量 | 43.9kDa |
實際分子量 | 44kDa(差異分析請參閱說明書) |
片段與標簽 | Gly29~Asn151 with N-terminal His and GST Tag |
緩沖液成份 | 20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM
DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） |
性狀 | 凍干粉 |
純度 | > 90% |
內(nèi)毒素水平 | <1.0EU/μg(LAL法測定) |
等電點 | 5.5 |
應(yīng)用 | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1．Ⅹ組磷脂酶A2(PLA2G10)重組蛋白(Mouse，小鼠)在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融
產(chǎn)品咨詢
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