簡要描述:超氧化物歧化酶1(SOD1)活性蛋白(Mouse,小鼠)緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:超氧化物歧化酶1(SOD1)活性蛋白(Mouse,小鼠)
物種:Mus musculus
(Mouse,小鼠)
英文名稱:Active
Superoxide Dismutase 1 (SOD1)
ALS; ALS1; IPOA; Superoxide Dismutase 1, Soluble; Amyotrophic Lateral Sclerosis 1,Adult; Superoxide dismutase [Cu-Zn]
型號:GOY-01D3178
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
來源 | 活性蛋白 |
宿主 | E.coli |
亞細胞定位 |
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預測分子量 |
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實際分子量 |
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片段與標簽 |
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緩沖液成份 | PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. |
性狀 | 凍干粉 |
純度 | > 95% |
內(nèi)毒素水平 |
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等電點 | 6.3 |
應用 | Cellculture;ActivityAssays. |
規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1.超氧化物歧化酶1(SOD1)活性蛋白(Mouse,小鼠)在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法)
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融
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