簡要描述:磷酸化原癌基因c-Met抗體注意事項;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
產(chǎn)品分類
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商品屬性:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
GOY-01K5757 | 磷酸化原癌基因c-Met抗體 | 50ul |
GOY-01K5757 | 磷酸化原癌基因c-Met抗體 | 100ul |
GOY-01K5757 | 磷酸化原癌基因c-Met抗體 | 200ul |
英文名稱: phospho-MET (Tyr1356)
中文名稱: 磷酸化原癌基因c-Met抗體
英文別名英文別名 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse,
Rabbit, Sheep
標記
Unconjugated
抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原
KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human MET around
the phosphorylation site of Tyr1356
蛋白細胞定位 細胞膜,分泌型蛋白
純化方法 Affinity purified by Protein A
亞型
IgG
性狀
Liquid
濃度
1mg/ml
儲存液
0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store
at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw
cycles.
產(chǎn)品介紹 c-Met, a member of the
tyrosine kinase superfamily, is the receptor for hepatocyte growth factor, also
known as scatter factor (HGF/SF). The mature c-Met protein is a
disulfide-linked heterodimer with Mr=190 kDa composed of a heavily glycosylated
alpha subunit that is completely extracellular in localization, and a beta
subunit comprising an extracellular ligand binding domain, a single
transmembrane domain, and a cytoplasmic tyrosine kinase domain. Cells expressing
c-Met include epithelial cells, endothelial cells, blood cells of various
types, and glomerular mesenchymal cells.
HGF/SF binding to c-Met stimulates receptor dimerization and the
phosphorylation of numerous residues within the receptor’s cytoplasmic domain. Signaling proteins that are phosphorylated
and/or localized in response to c-Met phosphorylation include: Grb2, Shc, Cbl,
Crk, cortactin, paxillin, GAB1, PI3K, FAK,
實驗流程:
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的制備過程:
1.免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3.免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5.磷酸化原癌基因c-Met抗體免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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