苯胺4羥化酶(AH)測(cè)試盒可見分光光度法
分光光度法 50 管/24 樣
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
細(xì)胞色素 P450 酶是一組主要存在于肝臟的同工酶,在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用,尤其是藥物和毒物的代謝。AH 在 P450 酶系中相當(dāng)于 CYP2E1 亞型,CYP2E1 不僅參與了藥物的代謝,而且還能催化多種前致癌物和前毒物的活化過程。
測(cè)定原理:
AH 催化苯胺羥化后產(chǎn)生的 4-氨基酚,進(jìn)一步轉(zhuǎn)變?yōu)榉?/span>-吲哚復(fù)合物,在 630nm 處有特征吸
收峰;通過測(cè)定 630nm 吸光度增加速率,來計(jì)算 AH 活性。
自備儀器及用品:
可見分光光度計(jì)、普通離心機(jī)、超速離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1mL 玻璃比色皿、雙蒸水和
冰。
試劑組成和配制:
試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 50 mL 蒸餾水,充分溶解。
試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 26 mL 蒸餾水,充分溶解。
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 13 mL 蒸餾水,充分溶解。
試劑五:液體×1 瓶,4℃保存。
試劑六:粉劑×1 瓶(腐蝕性試劑),4℃避光保存。臨用前加入 26 mL 蒸餾水,充分溶解。
試劑七:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加入 26 mL 蒸餾水充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)液:液體×1 瓶,10μmol/L,4℃避光保存。
