鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶(OAT)測(cè)試盒紫外分光光度法
分光光度法 50 管/48 樣
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
脯氨酸是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同,分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶( δ-OAT) 是以鳥氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關(guān)鍵酶,對(duì)植物適應(yīng)逆境脅迫起關(guān)鍵作用。
測(cè)定原理
鳥氨酸和α-酮戊二酸在鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶和 NADH 作用下發(fā)生氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成吡咯啉-5-羧酸(P5C),同時(shí)產(chǎn)生 NAD,通過檢測(cè) 340nm 處的吸光度的變化可反映出鳥氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性的高低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外可見分光光度計(jì)、1mL 石英比色皿。
試劑組成和配制
提取液:液體 55mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 70 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加 20mL 試劑一充分溶解;用不完的試劑 4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加 20mL 試劑一充分溶解;用不完的試劑 4℃保存。
試劑四:粉劑×2 瓶,-20℃保存;臨用前每瓶加 10mL 試劑一充分溶解;現(xiàn)配現(xiàn)用。
