簡要描述:淀粉磷酸化酶(SP)測試盒淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程唯一的可逆反應(yīng)酶,既可催 化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
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淀粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程唯一的可逆反應(yīng)酶,既可催 化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。 在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負(fù)責(zé)延長淀粉的 α-1,4- 葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中 的 α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān) 鍵酶。 在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷 酸濃度幾乎高了兩個(gè)數(shù)量級,一般認(rèn)為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的 淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。
測定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵與無機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在 磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原 NADP+產(chǎn)生 NADPH,使 340nm 下吸光值增加。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 3mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存;臨用前加入 3mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存。
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