簡要描述:輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒。NADPH/NADP +比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要 標(biāo)志之一,而且在 PPP 途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。
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輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NADP +和 NADPH 含量測 定可以計算 NADP(NADPH + NADP + )含量和 NADPH/NADP +比值,其變化與磷酸戊糖途 徑和生物合成以及抗氧化反應(yīng)密切相關(guān)。NADPH/NADP +比值不僅是細(xì)胞氧化還原態(tài)的主要 標(biāo)志之一,而且在 PPP 途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調(diào)控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中 NADP +和 NADPH。NADPH 通過 PMS 的遞氫作用, 使氧化型噻唑藍(lán)(MTT)還原為甲瓚,570nm 下檢測吸光值,從而測定 NADPH 含量。利 用 6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原 NADP +為 NADPH,從而檢測 NADP +含量。
所需的儀器和用品
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
酸性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 支,-20 ℃保存,用時加入 4mL 蒸餾水,混勻;用不完的試劑 4℃保存一周;
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 4mL 蒸餾水,混勻;用不完的試劑 4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 4mL 蒸餾水,混勻;用不完的試劑 4℃保存一周;
試劑五:液體 1.8mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 30mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:液體 50mL×1 瓶,4 ℃保存。
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