轉(zhuǎn)氫酶2測試盒紫外分光光度法
50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義
TH 位于線粒體的內(nèi)膜上,又稱為線粒體復合體六,催化 NADH+NADP+和 NAD++NADPH
相互轉(zhuǎn)化,調(diào)節(jié)線粒體 NAD(H)和 NADP(H)平衡。把逆向反應稱為 TH-2,催化 NADPH 和
NAD+生成 NADP+和 NADH。
測定原理
NADH 和 NADPH 均在 340nm 有特征吸收,因此 TH 催化的轉(zhuǎn)氫反應不能導致 340nm 吸光
度發(fā)生變化。用人工合成底物 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代 NAD+,TH-2 催
化 APAD+還原生成 APADH,APADH 在 375nm 有特征光吸收,測定 375nm 光吸收的增加速
率,來計算 TH-2 活性。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸
餾水。
試劑的組成和配制
試劑一:液體 50mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑二:液體 25mL×1 瓶,-20℃保存;
試劑三:液體 25mL×2 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 支,-20℃保存;
試劑五:粉劑×2 支,-20℃保存
