簡(jiǎn)要描述:禽沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
產(chǎn)品分類
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。?產(chǎn)品名稱:禽沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商
英文名稱:Salmonella gullinarumPCR
規(guī)格:詳見(jiàn)說(shuō)明書
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
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性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測(cè)試劑盒。
.試劑盒檢測(cè)特異性為00%
2. 檢測(cè)試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。?PIEC細(xì)胞株英文名(EN):(S)-(+)-Carvone,96%CAS No.:2244-6-8規(guī)格(SP):25ML類別(Key):通用試劑
PK36細(xì)胞株英文名(EN):Cyclobutanone,99%CAS No.:9-95-3規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
PLC/PRF/5細(xì)胞株英文名(EN):,0-Phenanthroline-5,6-Dione,97%CAS No.:2738-90-7規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
PRMI 8226 [RPMI-8226]細(xì)胞株 英文名(EN):-Boc-3-piperidone,97%CAS No.:98977-36-7規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
Psi2 DAP細(xì)胞株英文名(EN):4-Methylbenzophenone,99%CAS No.:34-84-9規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
Pt K (NBL-3)細(xì)胞株英文名(EN):4-Cyclohexanonecarboxylic Acid Ethyl E...CAS No.:759-79-4規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
QG-56細(xì)胞株英文名(EN):D-Glucurono-6,3-lactone acetonideCAS No.:2053-98-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
QGY-770細(xì)胞株英文名(EN):4-Hydroxy-6-methyl-2-pyrone,98%CAS No.:675-0-5規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
QGY-7703細(xì)胞株英文名(EN):2(5H)-Furanone,98%CAS No.:497-23-4規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
QSG-770細(xì)胞株英文名(EN):2-Hydroxy-2-methylpropiophenone,97%CAS No.:7473-98-5規(guī)格(SP):25ML類別(Key):通用試劑
R 60細(xì)胞株英文名(EN):Tetrahydro-2,2-dimethyl-4H-pyran-4-oneCAS No.:94-6-7規(guī)格(SP):250MG類別(Key):通用試劑
RAG細(xì)胞株英文名(EN):7-Hydroxy-3,4-dihydro-2(H)-quinolinon...CAS No.:22246-8-0規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
Raji細(xì)胞株英文名(EN):3'-Acetamidoacetophenone,≥98.0%CAS No.:7463-3-2規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
Ramos(RA )細(xì)胞株英文名(EN):3′-Methoxyacetophenone,97%CAS No.:586-37-8規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
Ramos細(xì)胞株英文名(EN):5'-Fluoro-2'-hydroxyacetophenone,98%CAS No.:394-32-規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
RAW264.7細(xì)胞株英文名(EN):2'-Fluoropropiophenone,98%CAS No.:446-22-0規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
RBE細(xì)胞株英文名(EN):Cyclopropyl Methyl Ketone,99%CAS No.:765-43-5規(guī)格(SP):25ML類別(Key):通用試劑
RBL-細(xì)胞株英文名(EN):4-Chloro-4'-fluorobutyrophenone,97%CAS No.:3874-54-2規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
禽沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商毛細(xì)管柱2500cm2原裝
安捷倫PLOT色譜柱卷Millipore
VF-5ht UltiMetal™高溫不銹鋼氣相GC毛細(xì)管柱卷Pall-Gelman
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