簡(jiǎn)要描述:駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱:駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌
英文名稱:Babesia caballiPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測(cè)試劑盒。
.駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌試劑盒檢測(cè)特異性為00%
2. 檢測(cè)試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
使用方法:
一、駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。?human γ-globulin人種球蛋白50kuBR,0.5u/mg
H-Tyr-OmeL-酪酯5克特純,98.5%
H-Trp-OMe•HClL-色酯鹽鹽5克特純,98.0%
H-Thr-OMe•HClL-蘇酯鹽鹽克特純,98.0%
HSF鐵蛋白(馬脾)00uBR,0-20u/mg
H-Ser-Ome•HClL-絲酯鹽鹽5克特純,
HSD羥基甾族化合物還原酶克BR,5u/ul,99%
H-Pro-OMe•HClL-卟啉酯鹽鹽5克特純,98.5%
H-Pro-OBzl•HClL-脯酯鹽鹽5克特純,98.0%
H-Phe-OMe•HClL-基酯鹽鹽0克特純,98.0%
H-Phe-OEt.HClL-基酯鹽鹽0克特純,99.0%
HPCD羥基倍他環(huán)糊精毫克超純,99%
Hotstart Taq DNA PolymeraseHotstart Taq DNA聚合酶25毫克高層析純,360NADu/mg,液體
Hot Taq DNA PolymeraseHot Taq DNA聚合酶25毫克層析純,200NADu/mg,液體
HONBN-羥基-5-降稀-2,3-二酰亞00克高純,99%
駑巴貝斯蟲PCR檢測(cè)試劑盒品牌芝麻林素 英文名稱:Sesamolin CAS號(hào):526-07-8 規(guī)格:0mg
梣酮 英文名稱:Fraxinellone CAS號(hào):28808-62-0 規(guī)格:20mg
植酸(UV98%) 英文名稱:Phytic acid CAS號(hào):83-86-3 規(guī)格:20mg
竹節(jié)參皂苷IVa 英文名稱:Chikusetsu saponin Ⅳa CAS號(hào):545-02-2 規(guī)格:20mg
竹節(jié)香附素A 英文名稱:Raddeanin(Anemodeanin) A CAS號(hào):8942-79-3 規(guī)格:20mg
英文名稱:Levodopa CAS號(hào):59-92-7 規(guī)格:20mg
棕櫚酸 英文名稱:Palmitic acid CAS號(hào):57-0-3 規(guī)格:20mg
紫檀芪 英文名稱:Pterostilbene CAS號(hào):537-42-8 規(guī)格:20mg
紫莖女貞苷A(95%) 英文名稱:Ligupurpuroside A CAS號(hào):47396-0-8 規(guī)格:0mg
紫莖女貞苷B 英文名稱:Ligupurpuroside B CAS號(hào):47396-02-9 規(guī)格:0mg
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