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簡要描述：NCI-H292 (人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移))生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
產(chǎn)品型號：GOY-01X0166 廠商性質(zhì)：科研更新時間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：550產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
NCI-H292 (人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)) | 1×10?/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0166 |
商品詳情：
名稱；NCI-H292 (肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移))
(STR鑒定正確)
別稱 H292; H-292; NCI-HUT-292;
Hut292; NCIH292
種屬 人類
年齡（性別） 女性，32歲
組織來源 肺粘膜上皮細胞癌；肺
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 NCI-H292細胞源自肺支氣管黏液上皮樣癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶；先用成份限定的培養(yǎng)基分離得到，然后換成含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)條件下，NCI-H292細胞保留了黏液上皮的特性，可從其超微結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)和多種鱗狀上皮分化標記的表達而判斷。NCI-H292細胞支持HBV的生長，左旋多巴脫羧酶陰性。NCI-H292細胞可以作為篩選模型，將人類亞基因組片段轉(zhuǎn)染入細胞來研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌發(fā)生中的作用。NCI-H292細胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線，但神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~48小時
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
致瘤性 Yes, in nude mice; tumors histologically resemble the original biopsy specimen and retain mucoepidermoid features.
基因表達情況 keratin; vimentin,The cells retain their mucoepidermoid characteristics in culture as determined by their ultrastructure and expression of multiple markers of squamous differentiation. TANK cells show reactivity with human alloantisera specific for the HLA A1, A3, A10, A19, B12, B17, B22 and B40 cross-reactive groups.
細胞培養(yǎng)步驟：
一、NCI-H292 (人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移))復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴格無菌操作；將小管細胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，并放置于凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
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