簡要描述:霍亂弧菌O(VC O)核酸檢測試劑盒廠家是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
產(chǎn)品分類
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性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月?產(chǎn)品名稱:霍亂弧菌O(VC O)核酸檢測試劑盒廠家
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?二苯醚 2 ug pGL2 -basic 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
苯乙乙酯 2 ug pGL2-control 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2-基噻唑 2 ug PGL2-enhancer 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
3,5-二氯苯甲 2 ug pGL3-promoter 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
水合 2 ug pGL3-Basic 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
N-Boc-順式-4-羥基-L-脯氨酯 2 ug pGL3- enhancer 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
,3,5-三乙苯 2 ug pGL3-IFNβ-lucifer 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
Fmoc-L-苯基 2 ug pGL3-control 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
3,4-二氯氯芐 2 ug pGL4.0 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
,,3,3-四甲氧基丙烷 2 ug pGL4.26[Luc2P/minP/Hygro] 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2-溴-5-三氟基甲 2 ug pGL4.27/CRE 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
3-溴芐胺 2 ug pGL4.27[luc2P/minP/Hygro] 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
雙(二異丙基氨基)(2-基乙氧基)膦 2 ug pGL4.28[luc2CP/minP/Hygro] 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
三乙醇胺 2 ug pGL4.29[Luc2P/CRE/Hygro] 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
3,5-二甲氧苯胺 2 ug pAdEasy- 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
霍亂弧菌O(VC O)核酸檢測試劑盒廠家AQP-0 大鼠水通道蛋白0*含量:≥98%
Beta-Nph(Mouse Beta-naphthol) 小鼠β萘酚 進(jìn)口,*含量:≥98%
CCK-8(cholecystokinin octapeptide) 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽 進(jìn)口/國產(chǎn)含量:≥95%
TG 大鼠甲狀腺球蛋白現(xiàn)貨供應(yīng)含量:≥97%
C3(Mouse Complement 3) 小鼠補(bǔ)體蛋白3*含量:98%
INH-A 大鼠抑制素A 進(jìn)口,*含量:≥97%
TAP(trypsinogen activation peptide) 人原激活肽 進(jìn)口/國產(chǎn)含量:≥95%
AZT(Mouse Azidothymidine) 小鼠現(xiàn)貨供應(yīng)含量:≥95%
Beta-CG 大鼠絨毛膜β*含量:≥92%
Alpha-AGP(Alpha-Acid glycoprotein) 人α性糖蛋白 進(jìn)口,*含量:95%
Beta-glucosidase(Mouse Beta-glucosidase ) 小鼠β葡糖苷酶 進(jìn)口/國產(chǎn)含量:97%
eNOS-3(Alpha-Acid glycoprotein) 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3現(xiàn)貨供應(yīng)含量:95%
DA(Mouse dopamine) 小鼠多巴胺*含量:≥95%
SHBG 大鼠性激素結(jié)合球蛋白 進(jìn)口,*含量:≥95%
DHEA-S7 大鼠脫氫表雄酮S7 進(jìn)口/國產(chǎn)含量:≥95%
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
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