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簡要描述：產(chǎn)品可保小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品型號：GOY-01X1248 廠商性質(zhì)：科研更新時間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：314產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品名稱：小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞
貨號：GOY-01X1248
分類：原代細(xì)胞
2.組織來源：眼球
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自視神經(jīng)乳頭；視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網(wǎng)膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭有一小凹陷區(qū)，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經(jīng)纖維聚合組成視神經(jīng)的起始端，它沒有視細(xì)胞，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼早受損的部位，星形膠質(zhì)細(xì)胞是視神經(jīng)乳頭處主要的膠質(zhì)細(xì)胞類型，可為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞無髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。青光眼視變是不可逆性致肓眼病。青光眼視變以視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突喪失并伴有視乳頭處細(xì)胞外基質(zhì)重坦為主要特征。導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞喪失的病理生理機制尚未闡明，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對調(diào)控神經(jīng)元微環(huán)境起多重作用，越來越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細(xì)胞町能對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、損傷、修復(fù)及再生起極為關(guān)鍵的作用。視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規(guī)則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見，核周有較密集物質(zhì)，胞質(zhì)稀疏，骨架結(jié)構(gòu)良好，明顯不同于長梭形的成纖維細(xì)胞形態(tài)。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形 傳代特性 可傳3代左右 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
小鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
產(chǎn)品咨詢
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