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簡要描述：產品可保大鼠小腸Cajal間質細胞的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠小腸Cajal間質細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于大鼠小腸Cajal間質細胞的體外培養(yǎng)。本產品僅供進一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產品型號：GOY-01X1249 廠商性質：科研更新時間：2023-10-24 00:00:00訪 問 量：318產品分類
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產品名稱：大鼠小腸Cajal間質細胞
貨號：GOY-01X1249
分類：原代細胞
2.組織來源：小腸組織
3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：大鼠小腸Cajal間質細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。Cajal間質細胞（ICC）是一類主要分布于胃腸道的間質細胞，是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞，與肌細胞以及末梢神經元有著緊密的關系，具有激發(fā)和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術，清楚觀察到了ICC位置分布和內部精細結構；應用免疫熒光等生化技術，發(fā)現(xiàn)了其特殊表達的c-kit蛋白；利用電生理技術，得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關。多年來，學者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡，并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機制。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠小腸Cajal間質細胞采用膠原酶消化法結合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠小腸Cajal間質細胞經c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態(tài) 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳1-2代 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yǎng)操作：
大鼠小腸Cajal間質細胞1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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