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半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
分光光度法 50T/24S
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬
(如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。
香菇酸在γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和半胱氨酸亞砜裂解酶的作用下轉(zhuǎn)化成香菇精,以及產(chǎn)生丙酮酸、
乙醛、甲醛和 NH3。CSL 是內(nèi)源性甲醛生成的關(guān)鍵酶之一,測(cè)定 CSL 活性對(duì)于研究食品安全具有重要意義。
測(cè)定原理
CSL 催化 S-甲基-L-半胱氨酸亞砜反應(yīng)產(chǎn)生丙酮酸,與 2,4-二硝基苯肼反應(yīng),在堿性條件下顯棕紅色,在 510nm 下有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 瓶,4℃避光保存,臨用前加入 2mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保
存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃避光保存,臨用前加入 10mL 水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃
保存;
試劑三:液體 15mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 6mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
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