堿性蛋白酶測試盒可見分光光度法
分光光度法 50 管/24 樣
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
AKP 是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類,屬于絲氨酸蛋白酶。此外,該酶還能
夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應用于制藥、
絲綢、食品、制革等行業(yè)。
測定原理:
在堿性條件下,AKP 水解酪蛋白生成酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸生成鎢藍;
鎢藍在 680nm 有特征吸收峰,測定 680nm 吸光度增加速率,來計算 AKP 活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1.5 mL EP 管、1mL 玻璃比色皿和
蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體 90mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存。臨用前加 10 mL 蒸餾水溶解。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入 20 mL 試劑一,沸水浴中磁力攪拌溶解。(可
在燒杯上蓋一層保鮮膜,注意觀察,避免水分全部蒸發(fā),一般加熱 15-30 分鐘,該試劑為過
飽和試劑,充分混勻后仍出現(xiàn)顆粒物不溶物不影響使用)。
試劑四:粉劑×1 瓶, 4℃保存。臨用前加 50 mL 蒸餾水溶解。
試劑五:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
標準品:液體 1mL×1 支,0.25 μ mol/mL 標準酪氨酸溶液,4℃保存
