胰蛋白酶測試盒紫外分光光度法
分光法 50T/48S
注意:正式測定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈,是一種重要的消
化酶。此外,胰蛋白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的
局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
測定原理:
胰蛋白酶催化水解 TAME 的酯鍵,釋放出的游離羧基與反應(yīng)體系中的氫氧化鈉發(fā)生中和反
應(yīng),導(dǎo)致溶液的 pH 值降低,以苯酚紅為指示劑,測定溶液在 555nm 處吸收值的變化,可以
快速測得胰蛋白酶活性數(shù)據(jù)。胰蛋白酶在一定范圍內(nèi)與 555nm 處吸收值的降低呈良好的線
性關(guān)系。
自備儀器和用品:
紫外可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和
蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 60 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 10 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體 4 mL×1 瓶,4℃保存
