甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒紫外分光光度法
分光光度法 50T/48S
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類(lèi)產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用 NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。
測(cè)定原理
甲醛脫氫酶催化甲醛和 NAD+產(chǎn)生 NADH,在 340nm 處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定 340nm 處的吸
光值變化,可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 15mL 水溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃
保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 3mL 水溶解待用。
試劑四:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存
