NADP蘋果酸酶(NADPME)測(cè)試盒紫外分光光度法
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
ME 廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME 催化蘋果酸氧化
脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和 CO2,以及伴隨 NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME 活性與生
物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物 ME 活性測(cè)定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和
對(duì)底物特異性的不同,可將 ME 分為 NAD-ME(EC1.1.1.38)和 NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測(cè)定原理:
NADP-ME 催化 NADP+還原成 NADPH,在 340nm 下測(cè)定 NADPH 增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1 瓶,4℃保存。;
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存; 臨用前加入 50mL 試劑一充分振蕩,溶解待用,用不完的試劑分裝后-20
度保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 6mL 蒸餾水充分振蕩,溶解待用,用不完的試劑分裝后-20 度
保存,禁止反復(fù)凍融。
