NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒紫外分光光度法
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
ME 廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME 催化蘋果酸氧化
脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和 CO2,以及伴隨 NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME 活性與生
物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物 ME 活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和
對底物特異性的不同,可將 ME 分為 NAD-ME(EC1.1.1.38)和 NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測定原理:
NAD-ME 催化 NAD+還原成 NADH,在 340nm 下測定 NADH 增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1 瓶,4℃保存。;
試劑一:液體 40mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1 支,4℃保存;用時加 2mL 蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反
復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1 支,-20℃保存;用時加 1mL 蒸餾水充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止
反復(fù)凍融。
