吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)測(cè)試盒可見分光光度法
分光光度法 50 管/24 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
脯氨酸是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同,分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS,Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以谷氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關(guān)鍵酶,對(duì)植物適應(yīng)逆境脅迫起關(guān)鍵作用。
測(cè)定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸生成 P5C 過程中分解 ATP 生成 ADP 和無機(jī)磷,通過鉬酸
銨比色法測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生無機(jī)磷的量可確定 P5CS 活性。
需自備的儀器和用品:
可見外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體 60 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 6 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 6 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存,用時(shí)加入 25 mL 蒸餾水,溶解后 4℃保存一周;
試劑五:粉劑×1 瓶,4℃保存,用時(shí)加入 25 mL 蒸餾水,溶解后 4℃保存一周;
試劑六:液體 25mL×1 瓶,室溫保存;
試劑七:10mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
